降钙素对兔骨关节炎关节软骨保护作用医学职称

发布时间：2022-10-09 23:05 热度：

　　摘 要：降钙素(calcitonin，CT)是一种含有32个氨基酸的直线型多肽类激素，在人体里是由甲状腺的滤泡旁细胞(parafollicular cells，又称C细胞)制造。在鱼类、爬虫类、鸟类、哺乳类身上都有发现这种激素。

　　关键词：降钙素,骨关节炎,灰度值,

　　目的]研究降钙素(calcitonin，CT)对骨关节炎关节软骨的保护作用。[方法]6个月龄新西兰大白兔20只，随机分为两组均行右膝关节前交叉韧带切断术。1周后实验组开始皮下注射降钙素5 IU/kg，每日1次;对照组注入等剂量生理盐水;术后6周处死动物。

　　取股骨内髁制成切片行HE、番红“O”和Ⅱ型胶原免疫组化染色。HE切片按照Mankin评分表评分。番红“O”染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色切片用图像分析仪，测量平均灰度值。[结果](1)对照组术侧膝关节组织学Mankin评分结果、番红“O”染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色平均灰度值测量结果高于健侧，(P<001)。

　　(2)对照组手术膝关节组织学评分、番红“O”染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色平均灰度值测量结果高于实验组手术膝关节，(P<005)。[结论]降钙素5 IU/ kg每日1次皮下注射够明显减轻兔膝关节不稳定诱发的骨关节炎关节软骨的退变。降钙素可能通过提高软骨基质糖胺多糖(glycosaminoglycans，GAG)和Ⅱ型胶原含量保护关节软骨。

　　本篇论文发表在《》 杂志由中国科协主管，中国病理生理学会主办的国家级糖尿病科普期刊《糖尿病新世界》杂志双月刊于近日创刊。

　　1 材料与方法

　　1.1 动物分组与处理

　　健康6个月龄雌性新西兰大白兔20只(购自北京大学医学部实验动物中心，批号：HCSCXK(京)2002-0005，体重(214～015)kg。随机分为两组，行右膝关节前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transection，ACLT)，术后3 d之内每日1次肌注青霉素20万U/只。自术后1～6周，实验组(ACLT+CT组)每日1次皮下注射降钙素(瑞士诺华制药有限公司生产，批号：H20040452)5 IU/kg，实验对照组(ACLT组)予等剂量生理盐水皮下注射。术后6周处死动物。对照组左膝关节作为空白对照与右侧膝关节对比以确定造模是否成功。对照组和实验组右膝关节对比确定降钙素对关节软骨所起的作用。

　　1.2 标本采集和处理

　　动物处死后，立即解剖膝关节，肉眼观察滑膜、滑液性状，以及关节面色泽、光滑度。切下股骨髁置于4%多聚甲醛中固定，15%EDTA2Na溶液脱钙，石蜡包埋，沿正中矢状面作6 μm薄切片。切片行HE染色、番红“0”(Safranin 0)染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色。

　　2 结 果

　　2.1 肉眼大体观察结果

　　对照组健侧膝关节外观正常，关节滑液清，关节面光滑，关节软骨略显淡蓝色，有光泽。对照组术侧膝关节肿胀严重，胫骨平台和股骨髁均可见骨性肥大。滑液色黄且混浊，滑膜亦呈黄色。关节面粗糙不平整、无光泽，颜色暗红，关节软骨破坏，关节边缘有大量骨赘形成，符合骨关节炎病理特点。

　　2.2 细胞形态学观察

　　对照组健侧膝关节股骨内髁关节面平整，光滑，HE染色基质染成粉红色，着色均匀，软骨细胞核呈深蓝色，细胞层次清楚，排列整齐，大小均一(图1)。

　　3 讨 论

　　本实验结果发现细胞组织形态学评分对照组术侧膝关节明显高于对照组健侧。表明本实验的骨性关节炎动物模型复制成功。番红“0”染色灰度值和II型胶原免疫组化染色灰度值测量术侧高于健侧，表明术侧GAG和Ⅱ型胶原含量低于健侧，说明在OA进程中伴随着GAG和Ⅱ型胶原的破坏和丢失。