肿节风系金粟兰科(Chloranthaceae)草珊瑚属植物草珊瑚Sarcandra glabra (Thumb.) Nakai的干燥全草，又名九节茶、接骨草、草珊瑚，其味苦、辛，性平，具清热凉血、活血消斑、祛风通络等功效[1
4006-054-001 立即咨询发布时间：2022-10-09 23:05 热度：
肿节风系金粟兰科(Chloranthaceae)草珊瑚属植物草珊瑚Sarcandra glabra (Thumb.) Nakai的干燥全草，又名九节茶、接骨草、草珊瑚，其味苦、辛，性平，具清热凉血、活血消斑、祛风通络等功效[1]，主要含有异嗪皮啶(isofraxidin)等香豆素类化合物及落新妇苷(astilbin)等黄酮类成分[2]，主产于广东、广西、江西等地，《中国药典》2005年版一部将其收载为正品药材。本文发表在《》上，文章以高效液相色谱法测定肿节风提取液中异嗪皮啶的含量，以紫外分光光度法测定总黄酮的含量，应用多指标综合评分法对正交试验结果进行分析，为肿节风相关制剂的研究开发提供参考，是核心医学论文发表范文。
1 仪器与材料
1.1 仪器
Dionex ultimate 3000高效液相色谱仪(光电二极管阵列检测器、Chromeleon色谱工作站);BS224S型电子分析天平(北京Sartorius);UV1101型紫外分光光度计(上海天美科学仪器有限公司)。
1.2 材料
芦丁对照品(批号：100080?200306，含量测定用)、异嗪皮啶对照品(批号：110837?200304 含量测定用)，均购于中国药品生物制品检定所;肿节风药材：购于广州致信药业有限公司，经鉴定符合《中国药典》2005年版一部肿节风项下标准;甲醇、乙腈为色谱纯，其余试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 正交试验设计
依据预试验结果，以乙醇浓度、乙醇用量、提取时间和提取次数为考察因素，每因素设3个水平，采用L9(34)正交试验表安排试验(见表1)。表1 因素水平表表2 正交试验结果
2.2 异嗪皮啶含量测定
2.2.1 色谱条件 色谱柱：Kromasil C18(250 mm×4.6 mm， 5 μm);流动相：乙腈?0.2%磷酸溶液(体积比20∶80);检测波长：344 nm;柱温：30 ℃;流速：1.0 mL/min;进样量：20 μL。
2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取异嗪皮啶对照品0.010 5 g， 用甲醇溶解并定容至10 mL量瓶中，精密吸取2 mL，用甲醇定容至50 mL，得质量浓度为0.042 mg/mL的对照品储备溶液。
2.2.3 供试品溶液的制备 称取肿节风药材20 g，置500 mL的圆底烧瓶中，按表2条件提取，滤过，分别定容至500 mL量瓶中，作为样品溶液。精密量取样品溶液25 mL，用提取溶剂分别定容至50 mL，精密吸取5 mL，置蒸发皿中，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10 mL，用0.45 μm的微孔滤膜滤过，即得。
2.2.4 标准曲线的制备 精密吸取异嗪皮啶对照品储备溶液1、2、3、5、10、15 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇定容，用0.45 μm的微孔滤膜滤过，精密吸取20 μL注入液相色谱仪，按上述条件测定异嗪皮啶吸收峰峰面积，以异嗪皮啶微克数为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y=948.96X+0.02，r=0.999 9，表明异嗪皮啶进样量在0.033 6～0.504 μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系。
2.2.5 含量测定 精密吸取供试品溶液、对照品溶液各20 μL，注入液相色谱仪，测定异嗪皮啶峰面积，计算异嗪皮啶含量。
2.3 总黄酮含量测定[3]
2.3.1 标准曲线的制备 精密称取芦丁对照品20.8 mg，置100 mL量瓶中，加体积分数为60%的乙醇溶解并定容至刻度，分别精密吸取0、2、3、4、5、6、7 mL，置25 mL量瓶中，分别加体积分数为60%的乙醇补足至7 mL，加入质量分数为5%亚硝酸钠1.0 mL，摇匀，静置6 min，加入质量分数为10%硝酸铝1.0 mL，摇匀，静置6 min，再加入质量分数为4%的氢氧化钠10.0 mL，用体积分数为60%的乙醇定容至25 mL，摇匀，静置10 min后，用可见-紫外分光光度计于510 nm处测吸光度。以芦丁对照品的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：
Y=11.717X-0.006，r=0.999 9
线性范围为0.016 64～0.058 24 mg/mL。
2.3.2 供试品溶液的制备 取“2.2.3”项下的溶液25 mL定容至50 mL量瓶中，精密吸取20 mL，置蒸发皿中，水浴蒸干，残渣用体积分数60%乙醇溶解并定容至25 mL，滤过，作为供试品溶液。 本文由教育大论文下载中心WwW.JiaoYuDa.CoM整理
2.3.3 含量测定 精密吸取供试品溶液2 mL置25 mL量瓶中，按“2.3.1”项下方法操作，测定吸光度值，计算样品中总黄酮的含量。
2.4 正交试验结果及分析
按异嗪皮啶含量和总黄酮含量各占50%的权重综合评分，对正交试验结果进行极差和方差分析，试验结果见表2。从结果可知，因素D对提取效率有显著性影响(P<0.01)，其他各因素排序为B>A>C，优选工艺条件为A2B3C3D3。由于因素B、C对提取效果的影响较小，结合生产成本考虑，进一步对A2B2C2D3与A2B3C3D3进行比较验证试验。结果异嗪皮啶含量分别为0.475 5 mg/g和0.477 9 mg/g，总黄酮含量分别为0.046 4 g/g和0.047 3 g/g，表明两者差异无显著性。确定提取工艺为A2B2C2D3，即50%(体积分数)乙醇、7倍量、每次提1.5 h，提取3次。
3 讨 论
3.1 本试验总黄酮的含量测定是参照文献[3]的方法进行，但在实验过程中发现,样品随放置时间延长，吸光度测定值逐渐减小，而且结果相差较大。因此，在试验的过程中应严格控制各个步骤的操作时间，保证各样品在同一条件下测定。
3.2 总黄酮和异嗪皮啶是肿节风药材的有效成分，体外抗肿瘤活性试验表明，异嗪皮啶具有抑制肿瘤细胞生长的作用，总黄酮对小鼠艾氏腹水癌实体型有一定的抑制作用[4，5]。本文采用高效液相色谱法和紫外-可见分光光度法分别测定异嗪皮啶和总黄酮的含量，并选择多指标综合评价方法确定最佳工艺条件，使所选工艺条件更合理可行。
【参考文献】
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：2005年版一部[S].北京：化学工业出版社，2005：154.
[2] WING Yan?tsui，GEOFFREY D B.Cycloeudesmanolides from Sarcandra Glabra[J].Phytochemistry，1996，43(4)：819-821.
[3] 王敦清，李先春.草珊瑚根茎叶中总黄酮成分的研究[J].中草药，1996，27(6)：237-238.
[4] 王菲，袁胜涛，朱丹妮.肿节风抗肿瘤活性部位的化学成分[J].中国天然药物，2007，5(3)：174-178.
[5] 周金煦，陆丽娟，胥彬，等.肿节风抗肿瘤作用的研究[J].肿瘤，1988，8(5)：261.
须知：《辽宁中医药大学学报》创刊于1984年，原名《辽宁中医学院学报》。1999年改为公开发行，仍为季刊。2003年改为A4开本。2004年改为双月刊。2006年第4期始，因主办单位辽宁中医学院更名，故随之更为现刊名。2008年第1期始更改为月刊。现任总编为辽宁中医药大学校长马骥教授，主编为辽宁中医药大学副校长康廷国教授，执行主编兼编辑部主任为覃芳编审。
