浅谈广西白背叶植物叶的化学成分

发布时间：2022-10-09 23:05 热度：

　　白背叶(Mallotus apelta)为大戟科(Emphor?biaceae)野桐属植物，又名白面戟、白桃树、白面风等[1]。味微苦涩，性平，其叶具有清热利湿、止痛解毒和止血的功效，可用于治疗口疮、跌打损伤、湿疹、外伤出血等，也可用于治疗慢性肝炎，对降低转氨酶和缩小肝脾有一定的作用，另外也可用于治疗水肿等疾病。1985年单雪琴等[2]报道在白背叶根的乙醇提取物中获得了高根二醇?3?醋酸酯、二羟基羽扇烷、β?谷甾醇和乌索酸乙酸酯4个化合物。徐一新等[3]也对白背叶根化学成分进行了研究，从中得到了4个化合物：Acetyl aleuritolic acid、高根二醇?3?醋酸酯、东莨菪内酯、胡萝卜苷。程晓芳等[4]对其根的乙醇提取物进行研究，得到18个化合物：1个三萜酯类化合物、8个二萜类化合物、5个香豆素类化合物、1个没食子酸衍生物、1个生物碱、1个谷甾醇类和蔗糖。安天英等[5]从其叶乙醇提取物得到19个化合物:11个苯并吡喃类化合物，1个二肽类化合物，5个黄酮类化合物，以及对羟基苯甲醛和β?谷甾醇。Phan Van Kiem等[6]从白背叶植物叶的甲醇提取物中分离得到7个五环三萜类化合物：3α?Hydroxyhop?22(29)?ene、hennadiol、friedelin(木栓酮)、friedelanol(木栓烷醇)、epifriedelanol(表木栓烷醇)、taraxerone(蒲公英赛酮)和epitaraxerol。

　　为了进一步研究其药理活性的物质基础，本文对广西白背叶植物叶的化学成分进行了研究，从叶中首次分离得到4个化合物，分别为大黄酚(Ⅰ)，烟酸 (Ⅱ)，异东莨菪内酯(Ⅲ)和对甲氧基苯甲酸 (Ⅳ)。

　　1仪器与材料

　　熔点用Kafler显微熔点测定仪测定(温度计未校正);红外光谱用EQUINOX55型红外光谱仪测定。质谱用ZAB?HS型双聚焦磁质谱仪;核磁共振用Varian?INOVA500MHz超导核磁共振波谱仪;柱层析和薄层层析硅胶均由青岛海洋化工厂生产。显色剂为碘蒸气和5%磷钼酸乙醇溶液。所用试剂均为分析纯。药材于2004年7月采于广西金秀县，由广东药学院中药学院刘基柱老师鉴定为Mallotus apelta。

　　2提取与分离

　　取干燥的广西白背叶10 kg粉碎，粗粉用热水煎煮3次 ，合并煎煮液，浓缩干燥得到2 kg浸膏，粉碎，用70%(体积分数)乙醇溶解滤除不溶物，滤液加2～3倍量水，水浴蒸至无醇味，依次用氯仿、乙酸乙酯萃取，得到氯仿部位和乙酸乙酯部位。

　　将氯仿萃取物40 g 经硅胶(200目)柱层析，用石油醚?乙酸乙酯梯度洗脱，TLC监测。其中，石油醚?乙酸乙酯(50∶1)流份，用石油醚/乙酸乙酯重结晶得到化合物Ⅰ(20 mg);石油醚?乙酸乙酯(10∶3)洗脱，甲醇重结晶得到化合物Ⅱ(30 mg);石油醚?乙酸乙酯(4∶1)洗脱，用石油醚/乙酸乙酯重结晶得到化合物Ⅲ; 石油醚?乙酸乙酯(10∶1)流份，用石油醚/乙酸乙酯重结晶得到化合物Ⅳ(20 mg)。

　　3结构鉴定

　　化合物Ⅰ～Ⅳ的结构式　　化合物Ⅰ:红色颗粒，mp197～199 ℃,Borntra?ger反应呈红色，醋酸镁反应呈橙红色，示为蒽醌类物质。紫外可见区有5个吸收峰:235、255、286、308、427，其峰位具有典型的羟基蒽醌类化合物的紫外特征吸收。IRKBr(cm-1)： 1 606，1 568，1 476，1 453应为苯环及其相应的弯曲振动峰;2 924提示结构中也可能存在甲基;1 677应为游离羰基;1 628应为缔合羰基，证明具1，8二羟基。　　1H?NMR(500 MHz,Acetone)： δ 12.03(1H)和11.93(1H)处于低场，为苯环上的酚羟基;δ7.82(1H,d,J=8 Hz,H?6)，δ7.77(1H,dd,J=8 Hz,J=1 Hz,H?5)，δ7.62(1H,t,H?4)，δ7.35(1H,dd,J=8 Hz,1 Hz,H?7), δ7.19(1H,q,H?2)，推断应为蒽醌母核上的ph?H;δ2.50(3H,s)应为与苯环相连的甲基，处于较低场，因此推测该甲基与羟基将为间位,而且H2和H4均呈现由于远程耦合所致的细微的多重裂分，也证实3位甲基的存在;有5个芳氢亦说明该化合物为三取代蒽醌。　　 13C?NMR (125 MHz Acetone)：δ 192.8和182.1提示存在与苯环相连的羰基;δ 138.2,125.1,124.9,121.6,120.3 应为蒽醌母核上的CH;22.1应为与苯环相连的甲基。EI?MS(m/z):254(100%),239,237,226,198,181,152,90,76等;分子离子峰254即基峰与蒽醌类化合物的质谱特点相符，主要碎片中有连续失去CO的226，198，以及失去OH(237)，CH3(239)等取代基的碎片离子，以及由母核骨架208连续失去CO后(180，152)再裂解产生的双电荷离子碎片(90，76)。根据以上光谱分析和质谱数据推测化合物1应是1，8?二羟基?3?甲基蒽醌，与文献[7]对照，发现其理化数据与大黄酚基本一致，鉴定为大黄酚。理化数据 1H?NMR(500 MHz,Actone):δ： 7.82(1H,q,J=8 Hz,H=7)，7.77(1H,dd,J=8Hz, J=1Hz, H=6)，7.62(1H,s,H?4)，7.35(1H,dd,J=8 Hz,J=1 Hz,H?5)，7.19(1H,s,H?2)，2.50(3H,s,H?11)。13C?NMR (125 MHz,Acetone)δ:163.1(C?1)，125.1(C?2)，135.0(C?3)，120.3(C?4)，132.1(C?4a)，124.9(C?5)，134.7(C?5a)，138.2(C?6)，150.9(C?7)，163.0(C?8)，120.1(C?8a)，192.8(C?9)，182.1(C?10)，22.1(C?11)。

　　化合物Ⅱ：白色针状晶体(甲醇), mp234～237 ℃, IRKBr(cm-1)：1 712提示存在共轭羰基,观察不到芳环特征峰。　　13C?NMR 和DEPT谱可观察到4个CH以及2个季碳, δ166.2显示可能存在羧基;δ153.3,150.2,136.9,126.5,123.8提示存在与极性基团相连的烯烃基团。1HNMR(500 MHz)质子信号出现相互耦合高级裂分形成的多重峰，因此推断化合物应为环状,具有芳环特征; δ13.38的氢处于如此低场，应为羧基;δ7.54的氢与其他氢均有耦合,其中与δ8.27的氢耦合常数为8,与δ8.79的氢耦合常数为5,与δ9.07的氢耦合常数为1;δ8.79的氢与δ8.27的氢耦合常数为2，耦合常数如此小，且处于如此低场，与吡啶化合物的氢波谱行为形似，因此可能为以吡啶为母核的化合物。

　　与文献[8]对照，发现与2位或3位羰基取代的吡啶的氢谱基本一致，氢归属依次为δ7.54(5?H), δ8.27(4?H), δ8.79(6?H), δ9.07(2?H)，因此推定化合物Ⅱ为羧基取代的吡啶。与文献[8]的碳谱比较，2位取代吡啶的化合物杂环上季碳化学位移在130～140之间，约在135的位置，3位取代吡啶的化合物杂环上季碳化学位移在120～130之间，约在126的位置，与13C?NMR中季碳126.5接近，因此鉴定为3位取代的吡啶化合物。综合碳谱和氢谱，推断分子式为C6H5O2。与文献[9]对照，鉴定化合物Ⅱ为烟酸。理化数据1H?NMR(DMSO,125 MHz)δ：7.54(5?H)，8.27(4?H)， 8.79(6?H)，9.07(2?H)。13CNMR(DMSO,500 MHz)δ：166.2(—COOH)，153.3(C2)，150.2(C?6)，136.9(C?4)，126.5(C?3)，123.8(C?5)。

　　化合物Ⅲ：淡黄色针晶(EtoAc),mp205～206.4 ℃，FAB?MS给出分子量192，结合DEPT谱确定分子式为C10H8O4。硅胶薄层色谱在365 nm紫外灯下显蓝色荧光。 UVλmax(甲醇)：204，224，292，340，显示有氧取代苯环和α?吡酮环。IRKBr(cm-1)：3 337，3 024，3 991，3 948，1 700，1 288，1 263，显示有酯基和苯环存在。1H?NMR(Acetone)谱显示有一个甲氧基质子信号，δ3.91(3H，s)，δ6.17(1H，d, J=9.6Hz)与δ7.83(1H，d, J=9.6Hz)有邻位偶合关系，为香豆素特征;δ6.79(1H，s)和δ7.19(1H，s)两者无明显偶合关系，说明为苯环对位H,提示该香豆素的6，7位有取代，根据分子式可知6，7位应为甲氧基及羟基取代。13C?NMR (125 MHz,Acetone)：δ160.3为香豆素内酯环的羰基;δ 150.2(C?6),150.9(C?7)与东莨菪内酯6，7位的碳化学位移值明显不同。综合以上数据，与文献[10]对照，鉴定为异东莨菪内酯。理化数据1H?NMR(500 MHz,DMSO)δ: 3.91(3H，s,C?11), δ6.17(1H，d, J=9.6 Hz,H?3), δ7.83(1H，d, J=9.6 Hz,H?4), δ6.79(1H，s,H?5), δ7.19(1H，s,H?8)。13C?NMR (125 MHz,Acetone)δ: 160.3(C?2),112.4(C?3), 143.7(C?4)102.8(C?5),150.2(C?6),150.9(C?7),109.1(C?8),145.0(C?9)，111.2(C?10)。

　　化合物Ⅳ：淡黄色粉末(石油醚/乙酸已酯)，mp165.7～168.7 ℃，易溶于甲醇，溴甲酚绿试剂显黄色。IRKBr(cm-1):3 500～2 000(br,羧基),2 200～2 000的泛频峰及1 576,1 603,提示存在苯环。DEPT谱及1H?NMR提示分子中存在1个CH3，4个CH ，3个季碳和1个羧基，从而推断分子式为C8H8O3。13C?NMR (氘代丙酮):δ 167.398吸收峰证实共扼羧基的存在，1个甲氧基信号是55.837。 1H?NMR(氘代丙酮)：δ3.886(3H,s)证明存在1个CH3;7.0(2H,d), 8.0(2H,d) 为AA′XX′自旋偶合系统，为对位取代的苯环质子信号。综合以上分析，与文献[11]对照鉴定为对甲氧基苯甲酸。理化数据1H?NMR(Acetone,500 MHz) δ: 3.89(3H,s,H?1), 7.02(2H,d,J=8.8 Hz,H?3), 7.99(2H,d，J=8.8 Hz,H?4)。13CNMR(Acetone,125 MHz) δ: 55.8(C?1), 164.3(C?2), 114.5(C?3), 132.4(C?4), 123.8(C?5), 167.4(C?6) 。